Недавно су у часопису Сциенце Транслатионал Медицине објављени најновији резултати истраживања Цхунхонг Ма, Цхунианг Ли и Ксиниин Лиу са Медицинског колеџа Килу на Универзитету Схандонг.
Након скрининга више од 200,000 једињења, истраживачки тим је успешно идентификовао једињење малог молекула, МЛ-Т7, које циља на ТИМ-3. Резултати ин виво и ек виво експеримената су показали да је МЛ-Т7 био у стању да побољша антитуморско деловање ЦД8-позитивних Т-ћелија и ЦАР-Т-ћелија, и да само лечење директно инхибира прогресију тумора у мишева, и имао је синергистички ефекат са ПД-1 инхибиторима.
ТИМ-3 је мембрански протеин са јединственом структуром у свом ИгВ структурном домену познатом као ФГ-ЦЦ' расцеп, који је високо очувано место везивања за његов лиганд фосфатидилсерин (ПтдСер) и карциноембрионални антиген повезан ћелијски адхезиони молекул 1 (ЦЕАЦАМ1).
ТИМ-3 је мембрански протеин са јединственом структуром у свом ИгВ структурном домену познатом као ФГ-ЦЦ' расцеп, који је високо очувано место везивања за његов лиганд фосфатидилсерин (ПтдСер) и карциноембрионални антиген повезан ћелијски адхезиони молекул 1 (ЦЕАЦАМ1).
У овој студији, тим је идентификовао МЛ-Т7 из 204.380 једињења малих молекула у бази података Спецс путем виртуелног скрининга у комбинацији са функционалном стратегијом скрининга.
Користећи технике као што су површинска плазмонска резонанца (СРП) и анализе молекуларне динамике и кристалне структуре, тим је потврдио да МЛ-Т7 може посебно да циља на ФГ-ЦЦ' расцеп ТИМ-3 и да има већи афинитет за ТИМ{{ 4}} него ПтдСер и ЦЕАЦАМ1. МЛ-Т7 стабилизује своје везивање за ТИМ-3 кроз ФГ-ЦЦ' расцеп, ометајући везивање ТИМ-3 за ПтдСер, ЦЕАЦАМ1 везивање и интеракцију.
Скрининг и карактеризација МЛ-Т7
Резултати ин витро експеримената и експеримената на моделима миша показали су да је циљањем на ТИМ-3, МЛ-Т7 био у стању да промовише преживљавање, пролиферацију и антитуморску активност ЦД8-позитивних цитотоксичних Т ћелија и спречи функционалне Третман деплетион.МЛ-Т7 је резултирао повећањем регулације сигналног пута ИЛ-2/СТАТ5, повећањем ефекторских фактора као што су ИФН-, ТНФ- и ИЛ-2 и експресијом маркера активације (ЦД25 и ЦД69), а нивои експресије цитокина (ТЦФ1) везани за карактеризацију матичних ћелија су повећани; напротив, експресија маркера исцрпљености, као што су ПД-1 и ЦТЛА-4, је смањена, а удео терминално осиромашених Т ћелија је смањен.
Природне ћелије убице из урођеног имуног система, дендритске ћелије и њихове функције су на сличан начин негативно регулисали ТИМ-3. Посебно у дендритским ћелијама, такође постоји специфична висока експресија ТИМ-4. Истраживачки тим је открио да МЛ-Т7 не само да повећава активност убијања природних ћелија убица, већ и промовише сазревање дендритских ћелија и побољшава њихову способност представљања антигена делујући на ТИМ-3 и ТИМ-4 .
Користећи различите моделе миша примарног хепатоцелуларног карцинома, приметили су терапеутске ефекте МЛ-Т7. Резултати су показали да третман са МЛ-Т7 у дозама од 20 мг/кг или 50 мг/кг интраперитонеално свака два дана значајно инхибира раст тумора и продужи време преживљавања мишева и ослаби имуносупресивну природу туморског микроокружења у поређењу са Контролна група.
Даља истраживања су показала да сам третман са 20 мг/кг МЛ-Т7 имао сличну антитуморско активност као сам третман инхибитором ПД-1 од 100 мг/кг, а ова два су имала синергистички ефекат када се користе у комбинацији , реактивирајући ЦД8-позитивне Т ћелије и природне ћелије убице у микроокружењу тумора. 120 дана након третмана комбинацијом, 50% мишева је преживело (3/6 мишева), док су мишеви лечени само инхибитором МЛ-Т7 или ПД-1 једва преживели (0/6 мишева или 1/6 мишева преживео).
Ефекат комбиноване терапије са ПД-1 инхибиторима
Поред тога, третман МЛ-Т7 би могао значајно повећати цитотоксичност ЦАР-Т ћелија против туморских ћелија, истовремено индукујући ЦАР-Т ћелије да имају смањену апоптозу и појачану пролиферацију након очигледне метастазе. Штавише, третман МЛ-Т7 је ефикасно превазишао тежак проблем у терапији ЦАР-Т ћелијама, тј. спречавајући функционално исцрпљивање, чиме се побољшава ефикасност ЦАР-Т ћелија, у којој је 10 μМ МЛ-Т7 био најефикаснији у реверзибилизацији ЦАР-Т ћелија. трошење.
За побољшање ЦАР-Т ћелија
У смислу безбедности, МЛ-Т7 се добро толерише, а третман са дозом од 50 мг/кг МЛ-Т7 интраперитонеално убризганом свака два дана није резултирао значајним нежељеним догађајима код мишева.
Све у свему, ова студија је показала велики потенцијал МЛ-Т7, малог молекулског инхибитора ТИМ-3, за употребу у имунотерапији тумора. МЛ-Т7 није само добар у борби сам, већ је и способан да побољша анти- туморска активност терапије ћелијама ЦАР-Т и терапије инхибиторима ПД-1, која је безбедна и ефикасна, и заслужује да се даље развија за клиничко превођење.
